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預染蛋白marker

   蛋白marker可分為未預染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準以及預染的Marker即單色預染和多色預染。那么,什么是預染蛋白marker?預染蛋白marker為一些純化好的蛋白的混合物.這些蛋白混合物與一種藍色染料共價偶聯.可在凝膠電泳時出現強度均勻的8條帶.同未預染的蛋白marker相比,預染蛋白marker因與染料共價偶聯而在SDS-PAGE電泳時的遷移特性發生某些改變.
    預染蛋白分子量標準:預染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物,通過與染料共價耦聯,在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染蛋白分子量的出現方便了我們的實驗,這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時、電泳后,以及轉膜后監測電泳情況和估計遷移率   比如,已知垂直電泳*佳分辨區域大約在膠的2/3處,如果使用預染蛋白Marker就可以預測目標蛋白進入*佳分辨區時停止電泳以得到*佳分辨效果,如果觀察到Marker電泳異常也可以及時終止電泳,另外在Western Blot轉膜以后可以直接觀察蛋白轉膜是否完全,還可以在膜上標記蛋白分子量,所以吸引了許多實驗室人員購買預染蛋白標準。值得注意的是預染蛋白Marker與染料共價耦聯,所以在不同的緩沖條件下電泳時遷移特性可能會發生某些變化,可能導致一些偏差,所以不太適合**定位蛋白  不過多數情況下Marker的條帶未必能和我們的目標蛋白完全一樣,我們得到的也不過是一種相對Marker指示的參考大小,*后都需要Western來定性,所以如果不是要區分大小相近的條帶,預染Marker還是很好用的,而且也可以和未染色的蛋白標準一起使用。
    預染蛋白標準可以分為兩種:單色預染和多色預染,其實區別就在于幫助在實驗過程中辨認某個條帶的大小—Marker條帶越多參考價值越大,可就越難辨認區分,如果用不同的顏色來區別就比較好辨認。單色的Marker通常是利用其中某些條帶加倍濃度來提示其大小的。還有一點特別要注意,由于轉膜是一個將膠里的Marker濃縮在潔白的膜上,所以需要的上樣量相對少一些,如果想要在電泳過程中看到美麗的“彩虹”,或者單色的Marker往往需要比說明書里多加一些Marker的。
非預染蛋白marker和預染蛋白marker有什么區別
    非預染蛋白marker電泳時看不到條帶,染色后才能看到,而預染蛋白marker會有特定的某些蛋白條帶帶有顏色,電泳過程中可以觀察到,還有在WB過程中也起到轉膜是否成功的指示作用。
    預染的marker的分子量在不同濃度膠上跑出來是不一樣的,這個叫表觀分子量。未預染的marker是*準確的,如果只做wb,預染的marker就夠了,每次都能觀察轉膜情況。
    其他都是些細節上的區別,比如有些預染蛋白marker會做成彩虹色的,以便區別分子量大小有些預染蛋白marker的條帶比較多等等。
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