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FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液使用说明

FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液使用说明

技术文档编号:TBD0054SOP

ICLL PLUS不连续密度梯度分离液与梯度制备稀释液配比稀释后,可形成不同浓度(密度)梯度分离液,经低速(200-1000g)离心于数分至数十分钟内可达到满意的细胞分离效果。FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液不穿透细胞,无毒害,成功的用于动物细胞的分离。

试剂组成

名称:FICOLL PLUS 密度梯度原液 货号:P1114  100ml  梯度制备稀释液 100ml

【简介】

FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液与梯度制备稀释液配比稀释后,可形成不同浓度(密度)梯度分离液,经低速(200-1000g)离心于数分至数十分钟内可达到满意的细胞分离效果。FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液不穿透细胞,无毒害,成功的用于动物细胞的分离。

【操作方法】

  • 不同浓度(密度)分离溶液的制备,使用梯度制备稀释液参考下表将原液稀释至所需浓度:

原液浓度(%

80

67

56

45

32

20

比重(g/ml

1.090

1.077

1.067

1.056

1.043

1.031

  • 梯度分离层的制备:将梯度分离液由高密度至低密度逐层加入至离心管内,加入后应可见明显的梯度界面。
  • 上样:根据不同目的细胞,加入不同体积血液样品或单细胞悬液(样本体积及细胞浓度不宜过高,否则影响细胞的分离及回收)。
  • 离心:400-600g 离心 20-30min。根据不同样本个体差异及目的细胞特点,用户可适当调节离心力及离心时间(离心力*大不超过 1000g)。
  • 取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除分离溶液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于分离液层中,则需要逐层收集。收获含有分离液的细胞经 2 次洗涤后可供培养或检测用。

【注意事项】

  • 实验全过程需在 20±2℃下进行,否则影响离心效果。
  • 由于多层分离溶液之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
  • 试剂瓶盖需盖紧,防止蒸发和污染。

【储存条件及有效期】常温保存,有效期 2 年。本品易感染**,需无菌条件操作。无菌条件下操作,启封后置常温保存。如 4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。

【特殊细胞分离试剂盒举例】

1. 富含 NK 活性大颗粒**细胞(LGL)的纯化试剂盒(产品货号:NK2011H

  • **母细胞纯化和死细胞去除试剂盒(产品货号:P1114B
  • 【人不同血细胞的漂浮密度】

细胞

漂浮密度

细胞

漂浮密度

红细胞

1.090-1.110

**细胞

1.052-1.077

粒细胞


**细胞

1.062-1.075

嗜酸性

1.090-1.095

**细胞

1.065-1.077

嗜中性

1.080-1.085

**母细胞

1.065-1.077

单核细胞

1.050-1.066

自然杀伤细胞

1.050-1.070

血小板

1.030-1.060



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